新疆医科大学学报2023，Vol.46Issue(2) ：145-152.DOI:10.3969/j.issn.1009-5551.2023.02.001

慢乙肝治疗性疫苗IFN-γ-preS1表位分析及卡介苗重组穿梭质粒pMV261构建

Analysis of epitope of chronic hepatitis B therapeutic vaccine IFN-γ-preS1 and BCG recombinant pMV261 Shuttle plasmid construction

何月月 于明凯 朱玥洁 麦尔哈巴·艾斯卡尔 周玥 张峰波 鲁晓擘 丁剑冰
新疆医科大学学报2023，Vol.46Issue(2) ：145-152.DOI:10.3969/j.issn.1009-5551.2023.02.001
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慢乙肝治疗性疫苗IFN-γ-preS1表位分析及卡介苗重组穿梭质粒pMV261构建

Analysis of epitope of chronic hepatitis B therapeutic vaccine IFN-γ-preS1 and BCG recombinant pMV261 Shuttle plasmid construction

何月月 1于明凯 1朱玥洁 2麦尔哈巴·艾斯卡尔 1周玥 1张峰波 3鲁晓擘 4丁剑冰1
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作者信息

  • 1. 新疆医科大学基础医学院, 乌鲁木齐 830017
  • 2. 新疆医科大学第一附属医院生殖助孕中心, 乌鲁木齐 830054
  • 3. 新疆医科大学第一附属医院检验科, 乌鲁木齐 830054
  • 4. 新疆医科大学第一附属医院感染科, 乌鲁木齐 830054
  • 折叠

摘要

目的 运用生物信息学方法分析预测乙型肝炎病毒(Hepatitis B virus,HBV)的前S1(preS1)蛋白和重组IFN-γ-preS1蛋白的T、B细胞优势表位,构建卡介苗(Bacille calmette-guérin,BCG)重组pMV261穿梭质粒.方法 NCBI数据库中获取γ干扰素(Interferonγ,IFN-γ)和preS1的氨基酸序列,应用I-TASSER构建三级结构并对重组蛋白进行免疫模拟.利用SnapGene软件将重组IFN-γ-preS1蛋白全长基因插入大肠埃希菌-BCG穿梭质粒pMV261中,构建BCG重组pMV261.结果 preS1蛋白与重组IFN-γ-preS1蛋白分别由118和299个氨基酸组成.IFN-γ蛋白与特异性抗原preS1蛋白进行融合后,preS1蛋白的亲水性、稳定性均未发生改变,其二级结构和三级结构亦能正常表达.preS1蛋白经重组后,其B细胞抗原表位由preS1蛋白的4～18位、25～40位和41～59位氨基酸分别变为重组IFN-γ-preS1蛋白的185～199位、207～221和222～242位氨基酸,其余未发生改变;其Th细胞抗原表位、细胞毒性T(CTL)细胞抗原表位与重组IFN-γ-preS1蛋白的Th细胞抗原表位、CTL细胞抗原表位相比,仅位置改变,其余未发生改变.琼脂糖凝胶电泳模拟结果显示,重组IFN-γ-preS1蛋白大小为897 bp,空载质粒大小为4488 bp,构建的BCG重组pMV261穿梭质粒大小为5359 bp.免疫模拟结果表明,该重组疫苗可激活细胞免疫和体液免疫.结论 BCG重组pMV261穿梭质粒的构建,为进一步研究慢性乙型肝炎(Chronic hepatitis B,CHB)的BCG治疗性疫苗奠定了理论基础.

关键词

HBV/CHB/BCG/preS1/抗原表位/基因重组

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基金项目

国家自然科学基金(81960373)

国家自然科学基金(82060115)

出版年

2023
新疆医科大学学报
新疆医科大学

新疆医科大学学报

CSTPCD
影响因子：0.76
ISSN：1009-5551
参考文献量4
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