摘要
目的 探究金雀异黄酮(GEN)对甲基苯丙胺(METH)诱导的神经细胞损伤的保护作用及机制.方法 体外培养鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞系 PC12 细胞,分为空白对照组(PC12 细胞不做特殊处理)、METH 组(用终浓度为 3 mmol/L METH 溶液处理)、GEN 低、中、高剂量组(用终浓度为 1、10、100 μmol/L GEN+3 mmol/L METH 溶液处理)、阳性对照组(含终浓度为20 μmol/L阿立哌唑溶液处理).采用四唑盐比色法、Annexin-V FITC/PI 双染法分别检测 PC12细胞增殖、凋亡能力;氮蓝四唑光还原法检测超氧化物歧化酶(SOD)活性,采用硫代巴比妥酸法检测丙二醛(MDA)含量,铁离子还原法检测活性氧簇(ROS)水平;免疫印迹法检测凋亡相关蛋白[B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2 相关 X 蛋白(Bax)]及核因子 E2 相关因子 2/血红素加氧酶-1(Nrf2/HO-1)通路蛋白(Nrf2、H O-1)水平.结果 与空白对照组比较,METH 组 PC12 细胞存活率、SOD活性及Bcl-2、Nrf2、H O-1 蛋白水平降低(P<0.05),MDA含量、ROS水平及Bax蛋白水平升高(P<0.05);与METH 组比较,GEN低、中、高剂量组及阳性对照组PC12 细胞存活率、SOD活性及Bcl-2、Nrf2、H O-1 蛋白水平升高(P<0.05),MDA含量、ROS水平及Bax蛋白水平降低(P<0.05),且均呈剂量依赖性;GEN高剂量组以上各指标水平与阳性对照组比较差异无统计学意义(P>0.05).结论 GEN能促进METH 诱导的PC12 细胞增殖并抑制细胞凋亡,对神经细胞发挥保护作用,可能与促进Nrf2/H O-1 通路活化抑制氧化应激损伤有关.
基金项目
新疆维吾尔自治区自然科学基金(2019D01C288)