新疆医科大学学报2023，Vol.46Issue(9) ：1119-1123,1131.DOI:10.3969/j.issn.1009-5551.2023.09.001

p62敲除对细胞自噬的影响及其对泛素化修饰蛋白募集的作用

Effect of p62 knockout on cellular autophagy and its role in recruitment of ubiquitination-modified proteins

刘世玉 冯学召 古丽妮尕尔·司马义 席庆 阿仙姑·哈斯木 米娜
新疆医科大学学报2023，Vol.46Issue(9) ：1119-1123,1131.DOI:10.3969/j.issn.1009-5551.2023.09.001
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p62敲除对细胞自噬的影响及其对泛素化修饰蛋白募集的作用

Effect of p62 knockout on cellular autophagy and its role in recruitment of ubiquitination-modified proteins

刘世玉 1冯学召 2古丽妮尕尔·司马义 1席庆 3阿仙姑·哈斯木 4米娜5
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作者信息

  • 1. 新疆医科大学生物化学教研室,乌鲁木齐 830017
  • 2. 新疆医科大学病理生理学教研室,乌鲁木齐 830017
  • 3. 新疆医科大学生物学教研室,乌鲁木齐 830017
  • 4. 新疆医科大学第七附属医院,乌鲁木齐 830092
  • 5. 新疆医科大学第一附属医院临床医学研究院,乌鲁木齐 830054
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摘要

目的 探讨p62敲除对细胞自噬及泛素化蛋白募集的影响.方法 将野生型(Wild Type,WT)和p62基因敲除(p62 knockout,p62-KO)的大鼠肾上皮细胞(NRK)分别分为野生型阴性对照组(WT CT组)和野生型饥饿4 h组(WT Sta4 h组)、p62基因敲除阴性对照组(p62-KO CT组)和p62基因敲除饥饿4 h组(p62-KO Sta4 h组).WT CT组和p62-KO CT组中加入普通培养基,对细胞进行空白对照处理;WT Sta4 h组和p62-KO Sta4 h组中加入饥饿培养基,对细胞进行饥饿4 h处理.免疫印迹法鉴定和检测p62基因的敲除及自噬体标志蛋白微管相关蛋白1轻链3(LC3)、泛素化修饰蛋白(Ub)的表达;电子显微镜观察自噬体形成;激光共聚焦显微镜法观察LC3蛋白阳性点状结构的数量.结果 鉴定p62基因成功被敲除.饥饿处理4 h后,WT和p62-KO细胞中均能观察到自噬结构(包括自噬体和自噬溶酶体).与WTCT组比较,WTSta4 h组中LC3蛋白酯化和Ub蛋白表达水平升高(P＜0.05),LC3蛋白阳性点状结构数量显著增加(P＜0.01);与p62-KO CT组比较,p62-KO Sta4 h组中LC3蛋白酯化和Ub蛋白表达水平升高(P＜0.05),LC3蛋白阳性点状结构数量显著增加(P＜0.01).结论 p62参与细胞自噬并募集泛素化修饰蛋白,最终影响选择性自噬体底物的凝聚和降解.

关键词

p62/选择性自噬/泛素化蛋白/LC3

Key words

p62/selective autophagy/ubiquitinated protein/LC3

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基金项目

新疆维吾尔自治区自然科学基金(2020D01C180)

新疆维吾尔自治区"天山英才"培养计划项目(2022TSYCCX0030)

出版年

2023
新疆医科大学学报
新疆医科大学

新疆医科大学学报

CSTPCD
影响因子：0.76
ISSN：1009-5551
参考文献量4
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