摘要
目的 探讨胰岛素样生长因子-1(IGF-1)过表达的骨髓间充质干细胞(BMSCs)对白细胞介素1β(IL-1β)诱导的软骨细胞损伤的影响及相关机制.方法 慢病毒转染构建IGF-1过表达的BMSCs,使用倒置显微镜观察细胞形态,流式细胞仪鉴定骨髓间充质干细胞表面抗原表达,实时定量PCR和 Western blot法检测IGF-1 mRNA及蛋白表达情况.将IGF-1慢病毒转染的BM-SCs、空载体慢病毒转染的BMSCs、BMSCs分别与5 ng/mL IL-1β诱导的大鼠软骨细胞共同培养24 h后,CCK-8检测软骨增殖情况;Tunel法检测软骨细胞凋亡率;Western blot法检测Bcl-2相关X蛋白(Bax)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)、细胞色素C(Cytc)蛋白表达;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测细胞提取液中IL-1β、白细胞介素6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平.结果 IGF-1过表达的BMSCs提高IL-1β处理的软骨细胞增殖活性,抑制IL-1β诱导的软骨细胞凋亡,并降低细胞提取液中IL-1β、IL-6和TNF-α水平(P<0.05),下调软骨细胞中Bax、Caspase-3、Cytc等凋亡蛋白的表达水平,上调抗凋亡蛋白Bcl-2的表达水平(P<0.05).结论 IGF-1过表达的骨髓间充质干细胞可抑制IL-1β诱导的软骨细胞凋亡及炎性因子的表达,提高软骨细胞增殖活性.
基金项目
新疆维吾尔自治区重点研发计划项目(2021B03006)
新疆维吾尔自治区自然科学基金(2022D01C170)