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传染性肌肉坏死病毒快速检测方法的建立

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为建立一种检测传染性肌肉坏死病毒的荧光定量RT-PCR方法,利用GenBank中收录的该病毒的全基因序列,设计特异性的引物与TaqMan探针,并构建包含目的序列的质粒作为标准品,经过优化反应参数建立检测传染性肌肉坏死病毒的荧光定量RT-PCR方法.结果显示,建立的方法特异性良好,对其他8种病毒核酸无扩增,扩增总时长90 min.该方法的灵敏度达到220 copies/μL.重复性好,批内变异系数为0.3％～0.7％.外标法定量所需的标准曲线方程为y=﹣3.404x+37.21,相关系数R2=0.997,扩增效率为96.7％.应用建立的方法对15批南美白对虾样品进行检测,未检出阳性.试验结果表明,所建立的实时荧光定量RT-PCR方法特异、灵敏、可定量,适用于对虾样品中传染性肌肉坏死病毒的检测.

杨苗、林华、董新燕、陈世界、方智、张婧、安微、薛昌华、张妙

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四川大学华西医学院,成都 610013

传染性肌肉坏死病毒 检测方法 荧光定量RT-PCR

成都海关科技项目

SK201702

2019

畜牧兽医科学(电子版)

畜牧兽医科学(电子版)

ISSN：
年,卷(期)：2019.(4)
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