摘要
通过构建猪细小病毒(porcine parvovirus,PPV)NS蛋白的原核表达载体,表达纯化重组NS蛋白并制备其多克隆抗体,用于阐明NS蛋白的生物学功能及在PPV病毒复制过程中的作用机制.研究通过扩增PPV的NS目的基因,并利用限制性内切酶Bam HI和Xho I进行双酶切,采用分子克隆构建方法构建至pET28a-sumo-NS,通过加入 0.5 mol/L IPTG并设置不同诱导温度进行诱导表达,利用Ni-NTA纯化获得约71 ku的重组NS蛋白.以重组NS蛋白为抗原,混合佐剂皮下注射免疫 BALB/c小鼠,获得抗NS的多克隆抗体,检测抗体效价达到1:32 000,这将为后续研究PPV病毒复制机制及PPV疫苗的研发提供基础材料.
维普
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