猪细小病毒NS蛋白的原核表达纯化及多克隆抗体的制备

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中文摘要：通过构建猪细小病毒(porcine parvovirus,PPV)NS蛋白的原核表达载体,表达纯化重组NS蛋白并制备其多克隆抗体,用于阐明NS蛋白的生物学功能及在PPV病毒复制过程中的作用机制.研究通过扩增PPV的NS目的基因,并利用限制性内切酶Bam HI和Xho I进行双酶切,采用分子克隆构建方法构建至pET28a-sumo-NS,通过加入 0.5 mol/L IPTG并设置不同诱导温度进行诱导表达,利用Ni-NTA纯化获得约71 ku的重组NS蛋白.以重组NS蛋白为抗原,混合佐剂皮下注射免疫 BALB/c小鼠,获得抗NS的多克隆抗体,检测抗体效价达到1:32 000,这将为后续研究PPV病毒复制机制及PPV疫苗的研发提供基础材料.

作者：

聂晓宁、单靖微、陈龙欣、孙悦、田梦雪、孔莉、张丽萌

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作者单位：

郑州师范学院分子生物学实验室,河南郑州 450044

关键词：

猪细小病毒(PPV) NS基因原核表达蛋白纯化多克隆抗体

出版年：

2024

DOI：

10.19567/j.cnki.1008-0414.2024.12.001

畜禽业

四川省科学技术信息研究所

畜禽业

影响因子：0.15

ISSN：1008-0414

年,卷(期)：2024.35(12)