摘要
为在乳酸乳球菌中表达纤维二糖水解酶Ⅱ(CBH Ⅱ)基因,对绿色木霉(T.reesei)CBH Ⅱ基因序列进行密码子优化和合成,通过PCR及T4 DNA连接酶将人工合成的序列插入到表达载体pNZ8148 中,获得重组质粒pNZ8148-CBH Ⅱ,重组质粒经双酶切及测序鉴定正确后,将正确的重组质粒通过电击转化进入乳酸菌NZ3900 感受态细胞,通过选择性抗生素氯霉素筛选阳性克隆,放大培养后使用终浓度为20 ng/mL的Nisin进行诱导表达,诱导后的菌液经SDS-PAGE鉴定,有符合预期大小的条带,说明CBH Ⅱ基因在乳酸乳球菌NZ3900 中表达.研究为乳酸乳球菌的改造及开发临床应用奠定基础.
基金项目
广西兽医生物技术重点实验室开放基金(19-50-40-B-05)
维普
万方数据