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纤维二糖水解酶在乳酸乳球菌中的表达

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为在乳酸乳球菌中表达纤维二糖水解酶Ⅱ(CBH Ⅱ)基因,对绿色木霉(T.reesei)CBH Ⅱ基因序列进行密码子优化和合成,通过PCR及T4 DNA连接酶将人工合成的序列插入到表达载体pNZ8148 中,获得重组质粒pNZ8148-CBH Ⅱ,重组质粒经双酶切及测序鉴定正确后,将正确的重组质粒通过电击转化进入乳酸菌NZ3900 感受态细胞,通过选择性抗生素氯霉素筛选阳性克隆,放大培养后使用终浓度为20 ng/mL的Nisin进行诱导表达,诱导后的菌液经SDS-PAGE鉴定,有符合预期大小的条带,说明CBH Ⅱ基因在乳酸乳球菌NZ3900 中表达.研究为乳酸乳球菌的改造及开发临床应用奠定基础.

黄凯、何启杰、陈樱、欧阳康、黄伟坚、彭昊、韦祖樟、李军

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广西兽医研究所广西兽医生物技术重点实验室,广西 南宁 530005

广西大学动物科学技术学院动物传染病与分子免疫学实验室,广西 南宁 530005

农业农村部中国(广西)-东盟跨境动物疫病防控重点实验室,广西 南宁 530005

纤维二糖水解酶 克隆 乳酸乳球菌 表达

广西兽医生物技术重点实验室开放基金

19-50-40-B-05

2024

云南畜牧兽医
云南省畜牧兽医科学院 云南省畜牧兽医学会

云南畜牧兽医

影响因子：0.109
ISSN：1005-1341
年,卷(期)：2024.(1)
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