摘要
目的：研究外源性 p27kip1基因对膀胱癌细胞周期及细胞增殖的影响。方法构建携带人的 p27kip1 cDNA 的重组腺病毒载体，在体外转染膀胱癌 T24细胞，Western blot、FACS 及 MTT 检测分析外源性 p27kip1蛋白在细胞内的表达，以及对细胞周期及细胞增殖的影响。结果获得含人 p27kip1 cDNA 的重组腺病毒，滴度为1．6×109 pfu ／ml。体外转染 T24细胞24 h 后，p27kip1蛋白在 p27kip1转染后的 T24细胞中高表达；FACS 检测表明，p27kip1和 LacZ 重组腺病毒转染后的 T24细胞，经10％血清刺激后处于 G1期的细胞分别为86．92％和57．25％；MTT 法检测表明，人 p27kip1重组腺病毒转染后的 T24细胞经20％血清刺激后，48及72 h 的 A 值均低于 LacZ 重组腺病毒转染后的 T24细胞（P ＜0．01）。结论本研究中所制备的 p27kip1重组腺病毒能有效介导外源性 p27kip1基因在体外转染 T24细胞并高表达 p27kip1，抑制细胞由 G1期向 S 期过渡，从而抑制细胞增殖，为进一步研究 p27kip1基因治疗奠定了基础。
基金项目
上海市卫生计生系统重点专科建设基金(ZK2012A22)
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