首页|小金海棠二价铁转运蛋白基因MxIRT1定点突变的研究

小金海棠二价铁转运蛋白基因MxIRT1定点突变的研究

扫码查看
原文链接
  • NETL
  • NSTL
  • 万方数据
  • 维普
采用PCR技术对小金海棠(Malus xiaojinensis)二价铁转运蛋白基因MxIRT1的定点突变体系进行了探讨.根据MxIRT1开放阅读框(ORF)两端和突变位点序列各设计一对引物.通过PCR扩增,获得带有突变位点且在突变位点相互重叠的两个PCR片段.对以上两个片段的浓度进行调整后,将其用作PCR反应的模板.对退火温度和延伸时间进行优化后,利用ORF两端引物,将带有突变位点的两个片段拼接起来,从而获得了含有所要突变位点的MxIRT1,并将其插入pEASY-T2载体中.DNA序列分析表明在预期位点上已经发生了突变:MxIRT1编码的第186位密码子已由组氨酸残基变为丙氨酸残基,证明用PCR技术已成功地使MxIRT1基因发生突变.整个突变过程不需要任何回收与纯化步骤,是一个高效、快捷的定点突变体系.
Studies of Site Direct Mutagenesis of MxIRT1 Gene of Malus xiaojinensis

张学宁、孔瑾、王忆、韩振海、许雪峰

展开 >

中国农业大学果树逆境生理与分子生物学实验室,北京,100094

小金海棠 基因突变 定点突变技术 二价铁转运蛋白基因 缺铁病

北京市教委共建项目

JD100190532

2008

园艺学报
中国园艺学会 中国农业科学院蔬菜花卉研究所

园艺学报

CSTPCDCSCD北大核心
影响因子：1.127
ISSN：0513-353X
年,卷(期)：2008.35(2)
  • 1
  • 3