摘要
背景与目的:Rho GTP酶活化蛋白4(Rho GTPase activating protein 4,ARHGAP4)与肿瘤的进展密切相关,且对肿瘤细胞恶性增殖具有重要的调节作用.探讨ARHGAP4在肝癌组织中的表达及其对肝癌细胞生长的影响.方法:采用实时荧光定量聚合酶链反应(real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction,RTFQ-PCR)、蛋白质印迹法(Western blot)及免疫组织化学法分析肝癌组织中ARHGAP4的表达水平,并分析其表达与肝癌临床病理学特征及预后之间的关系.沉默ARHGAP4的表达,采用细胞计数试剂盒(cell counting kit-8,CCK-8)及EdU实验观测肝癌细胞的增殖情况,并检测肝癌细胞中己糖激酶2(hexokinase 2,HK2)的表达水平,进一步分析肝癌组织中HK2的表达及与ARHGAP4的相关性.在稳定低表达ARHGAP4的肝癌细胞中上调HK2的表达,在稳定高表达ARHGAP4的肝癌细胞中沉默HK2的表达,采用Western blot分析HK2的表达情况,采用EdU分析肝癌细胞的增殖能力.结果:肝癌组织中ARHGAP4的表达水平显著高于癌旁组织(P<0.01),且高表达的ARHGAP4与患者肿瘤体积大小及TNM分期密切相关.沉默肝癌细胞中ARHGAP4的表达,肝癌细胞的增殖能力及HK2的表达水平明显减弱(P<0.05);反之过表达ARHGAP4可显著增强HK2的表达及肝癌细胞的增殖能力(P<0.05),且肝癌细胞中ARHGAP4与HK2的表达呈正相关.结论:ARHGAP4通过正向调控HK2的表达进而促进肝癌细胞的生长.
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