摘要
背景与目的:膀胱癌是常见的泌尿系统恶性肿瘤之一,蛋白质精氨酸甲基转移酶7(protein arginine methyltransferase 7,PRMT7)在消化道肿瘤中的作用已有研究报道,但在膀胱癌中的生物学作用及机制尚未明确,本文旨在探究PRMT7对人膀胱癌细胞增殖和迁移能力的影响及其可能的作用机制.方法:体外培养人膀胱癌细胞系5637、T24、RT112、UM-UC-3和输尿管上皮永生化细胞系SV-HUC-1,采用蛋白质印迹法(Western blot)检测PRMT7的表达情况.采用RNA干扰技术沉默PRMT7基因的表达,设立阴性对照组(si-NC)及实验组(siPRMT7#1、siPRMT7#2),采用质粒转染法过表达PRMT7基因,设立阴性对照组(p-PCMV3)及实验组(p-PRMT7).采用实时荧光定量聚合酶链反应(real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction,RTFQ-PCR)及Western blot验证PRMT7的转染效率,采用细胞计数试剂盒-8(cell counting kit-8,CCK-8)和集落形成实验检测细胞增殖能力,采用transwell实验检测细胞迁移能力,采用Western blot检测增殖和迁移相关靶蛋白Cyclin D1、CDK4和MMP9以及Notch信号转导通路关键蛋白Notch1、HEY1和Hes1的表达情况.使用转染siPRMT7#2的细胞加入Notch信号特异性抑制剂γ-分泌酶抑制剂DAPT,进一步验证PRMT7在膀胱癌中的表达情况.结果:Western blot结果显示,PRMT7在膀胱癌细胞中低表达(P＜0.05).在5637细胞中沉默PTMT7后,细胞增殖和迁移能力显著增强(P＜0.05),增殖和迁移相关靶蛋白Cyclin D1、CDK4和MMP9以及Notch信号通路关键蛋白Notch1、HEY1和Hes1的表达明显增加(P ＜0.05);而在T24细胞中过表达PRMT7后,呈相反的趋势.使用DAPT后,明显逆转了PRMT7在膀胱癌细胞中的表达.结论:PRMT7抑制膀胱癌细胞增殖和迁移,其作用机制与Notch信号转导通路有关.
基金项目
承德医学院-国家自然科学基金培育基金(202114)
承德医学院-校级重点课题基金(201711)
河北省重点学科建设项目(冀教高20134号)
河北省硕士在读研究生创新能力培养资助项目(CXZZSS2022141)
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