摘要
目的:探讨自噬对肠缺血再灌注损伤中细胞铁死亡的影响.方法:采用随机数字表法将24只SPF级Wistar大鼠(体质量200～220 g)分为4组(n=6):伪手术组(sham组)、缺血组(I组)、缺血再灌注组(I/R组)、缺血再灌注+自噬抑制剂组(I/R+3-MA组).夹闭肠系膜上动脉1 h构建缺血模型,再灌注2h建立大鼠肠缺血再灌注损伤模型;采用HE染色光镜下观察肠黏膜病理改变并行Chiu评分;比色法检测Fe2+含量;ELISA法检测乳酸脱氢酶(LDH)、过氧化脂质(LPO)含量;Western Blot检测铁蛋白重肽(ferritin heavy pol-ypeptide,FTH)1、核受体共激活子(nuclear recep-tor coactivator,NCOA)4、LC3-II/I表达,透射电镜检测线粒体形态.结果:与sham组比较,其余3组小肠组织Chiu评分均增高(P<0.01),LC3II/I表达上调,FTH1、NCOA4表达下调(P<0.01),I组、I/R组LDH、Fe2+含量升高(P<0.01),I/R+3-MA组LDH(P<0.05)、Fe2+含量升高(P<0.01),I/R组LPO含量升高(P<0.01);与I组比较,I/R组Chiu评分增高(P<0.01)、LDH、Fe2+(P<0.05)、LPO(P<0.01)含量升高,FTH1、NCOA4表达下调、LC3II/I表达上调(P<0.01);与I/R组比较,I/R+3-MA组Chiu评分下降,LDH、LPO(P<0.01)、Fe2+(P<0.05)含量下降,FTH1、NCOA4表达上调,LC3II/I表达下调(P<0.01).线粒体形态学变化:sham组可见肠组织结构完整,线粒体数量较多结构完整;I组线粒体嵴数量减少,双层膜结构不完整;I/R组线粒体嵴大量减少,细胞器损伤严重.3-MA抑制后线粒体数量和内嵴有所增多,膜逐渐恢复完整.结论:肠I/R损伤中,自噬参与细胞铁离子的调控,促进细胞铁死亡的发生,抑制自噬可以减轻I/R肠损伤.
基金项目
甘肃省自然科学基金(20JR10RA727)
兰州大学第二医院萃英临床拔尖项目(CY2019-BJ12)
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