摘要
目的:研究栀子苷代谢产物京尼平(genip-in,GP)致人源肾小管上皮细胞(human renal tubu-lar epithelial cells,HK-2)毒性作用及对Nod样受体蛋白3(nucleotide-binding domain-like receptor 3,NLRP3)通路的影响.方法:采用CCK8法初步确定GP对HK-2细胞的毒性剂量及作用时间,通过Hoechst 33342/PI检测细胞凋亡/坏死率,试剂盒法检测乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)释放量和活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平,HCI检测线粒体膜电位(mitochondrial mem-brane potential,MMP)和Ca2+水平,qPCR检测肾损伤因子-1(kidney injury molecule-1,KIM-1)、骨桥蛋白(osteopontin,OPN)、NLRP3、Caspase-1、IL-1β、IL-18的mRNA水平.结果:与0μg/mL相比,GP>50μg/mL可显著降低细胞活力(P<0.05,P<0.01),且IC50值为110.50μg/mL.设置空白组、GP低、中、高(50、100、200μg/mL)剂量组;与空白组相比,GP中、高剂量组细胞密度下降;PI阳性率、LDH释放量、ROS、Ca2+浓度显著增加、MMP显著下降,KIM-1、OPN、NLRP3、IL-1β和IL-18 mRNA水平显著升高(P<0.05,P<0.01).结论:GP可能通过升高ROS、Ca2+,降低MMP激活NLRP3,造成HK-2细胞损伤.
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