摘要
目的 探讨小白菊内酯(PTL)对食管癌细胞增殖、凋亡和能量代谢的影响.方法 对人食管癌细胞Eca109转染肝激酶(LK)B1的短发夹RNA(shRNA)重组pLKO.1质粒(LKB1-shRNA)及阴性对照质粒(NC-shRNA),然后应用不同浓度的小白菊内酯处理Eca109细胞.使用CCK-8检测试剂盒测量细胞活力.使用膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素(Annexin V-FITC)/碘化丙啶(PI)双重染色分析细胞凋亡.使用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)和Western印迹分析检测LKB1、cleaved聚(ADP-核糖)聚合酶(PARP)、磷酸化AMP-激活激酶(AMPK)-α和AMPK-α的蛋白表达.使用Screen Quest荧光法葡萄糖摄取检测试剂盒检测葡萄糖摄取.使用三磷酸腺苷(ATP)分析试剂盒测量细胞ATP水平.结果 与未处理的Eca109细胞相比,10 μmol/L PTL孵育24 h后细胞中LKB1的表达水平显著升高(P＜0.05).PTL处理显著抑制了 Eca109细胞的增殖、葡萄糖摄取和ATP合成,并明显诱导了细胞凋亡(P＜0.05).PTL处理显著升高了 p-AMPK-α、LKB1和cleaved PARP的蛋白相对表达量(P＜0.05).沉默LKB1则明显逆转了 PTL对细胞增殖、凋亡、葡萄糖摄取和ATP合成的影响(P＜0.05).结论 PTL通过激活LKB1-AMPK轴来抑制食管癌细胞增殖、葡萄糖摄取和ATP合成,并诱导细胞凋亡.
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