奥马珠单抗通过miR-217/E2F3轴介导SMAD3表达水平对大鼠支气管哮喘ASMCs增殖和迁移的影响及作用机制

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中文摘要：目的研究奥马珠单抗对大鼠支气管哮喘(BA)气道平滑肌细胞(ASMCs)增殖、迁移的影响及作用机制。方法将30只大鼠按随机数字法分为空白组(以等量生理盐水腹腔注射、雾化吸入，其余操作不变)、模型组(使用卵白蛋白致敏及雾化吸入法构建BA大鼠模型)、奥马珠单抗组[基于模型组，腹腔注射166 mg/(kg·d)奥马珠单抗]。苏木素-伊红(HE)染色观察支气管肺组织病理改变;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清免疫球蛋白(Ig)E水平;使用动物呼吸机检测吸气阻力、呼气阻力变化。取对数生长的ASMCs分为对照组(不处理)、血小板源生长因子(PDGF-BB)组(加入10 ng/ml PDGF-BB构建哮喘细胞模型)、PDGF-BB+奥马珠单抗组(基于PDGF-BB组，使用10 μg/ml奥马珠单抗处理)、PDGF-BB+奥马珠单抗+miR-217 inhibitor 组(基于 PDGF-BB+奥马珠单抗组，转染 miR-217 inhibitor)、PDGF-BB+奥马珠单抗+miR-217 inhibitor+E2F转录因子3抑制剂(si-E2F3)组(基于PDGF-BB+奥马珠单抗+miR-217 inhibitor组，转染siDNA3。1-E2F3)、NC mimic组(基于PDGF-BB组，转染NC mimic)、miR-217 mimic组(基于PDGF-BB组，转染miR-217 mimic)。5-乙炔基-2'脱氧尿嘧啶核苷(EdU)检测细胞增殖;Transwell检测细胞迁移;实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测miR-217、E2F3水平;双荧光素酶实验检测miR-217、E2F3之间的靶向关系;Western印迹检测E2F3蛋白表达水平;免疫荧光检测SMAD家族成员(SMAD)3水平。结果对照组未见病理学改变，模型组出现炎症细胞浸润，气道平滑肌层和网明显增厚，奥马珠单抗组中上述组织病理学变化有所改善;模型组IgE、吸气阻力、呼气阻力较空白组明显升高(P＜0。05)，奥马珠单抗组IgE、吸气阻力、呼气阻力较模型组明显降低(P＜0。05);E2F3是miR-217的靶向mRNA，miR-217 mimic组中E2F3 mRNA和蛋白水平较NC mimic组明显降低(P＜0。05);PDGF-BB组ASMCs增殖率、迁移能力、E2F3水平较对照组明显升高，miR-217表达水平明显降低(P＜0。05);PDGF-BB+奥马珠单抗组ASMCs增殖率、迁移能力、E2F3水平、SMAD3水平较PDGF-BB组明显降低，miR-217表达水平明显升高(P＜0。05);PDGF-BB+奥马珠单抗+miR-217 inhibitor组ASMCs增殖率、迁移能力、E2F3水平、SMAD3水平较PDGF-BB+奥马珠单抗组明显升高，miR-217表达水平明显降低(P＜0。05);PDGF-BB+奥马珠单抗+miR-217 inhibitor+si-E2F3组ASMCs增殖率、迁移能力、E2F3水平、SMAD3水平较PDGF-BB+奥马珠单抗+miR-217 inhibitor组明显降低，miR-217表达水平明显升高(P＜0。05)。结论奥马珠单抗能够减轻BA大鼠肺组织损伤、减轻气道阻力及抑制ASMCs增殖、迁移，可能与调控miR-217/E2F3轴抑制SMAD3表达有关。

作者：

赵艳梅、闫萌、张振艳、张大或、高秀兰

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作者单位：

济宁骨伤医院药剂科,山东济宁 272000

济宁医学院附属医院检验科

济宁医学院附属医院药学部

关键词：

支气管哮喘奥马珠单抗非编码微小RNA-217 E2F转录因子3 SMAD家族成员3

出版年：

2025

DOI：

10.3969/j.issn.1005-9202.2025.01.049

中国老年学杂志

中国老年学学会吉林省卫生厅

中国老年学杂志

北大核心

影响因子：1.69

ISSN：1005-9202

年,卷(期)：2025.45(1)