目的:建立乌三金洗剂的质量标准.方法:薄层色谱法(TLC)对乌三金洗剂处方中黄柏、苦参、大黄、蛇床子及土荆皮进行定性鉴别;高效液相色谱法(HPLC)对乌三金洗剂中蛇床子素含量进行测定研究.以Wonda Cract ODS2 (4.6 mm×250 mm,5μm)为色谱柱;以乙腈-水(70∶30)为流动相;检测波长为322 nm;柱温设置30 ℃;流速设置1.0 mL/min.结果:黄柏、苦参、大黄、蛇床子及土荆皮薄层鉴别专属性强,特征斑点清晰,且阴性对照无干扰,可作为乌三金洗剂的定性鉴别.蛇床子素在12.63~252.60 μg范围内与峰面积呈较好的线性关系,回归方程为Y=0.0606X-0.0062(r=0.9999),平均回收率为96.45%,RSD =0.93%(n=6).结论:该法操作准确、简便,专属性强、稳定性及重复性良好,可有效控制乌三金洗剂的质量.