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芽枝霉菌Lcxs9产两种耐热β-葡萄糖苷酶的快速纯化及酶学特性研究

Rapid purification and enzymatic properties of two thermostable β-glucosidase from Cladosporium cladosporioides Lcxs9

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以高产6-葡萄糖苷酶的芽枝霉菌(Cladosporium cladosporioides)Lcxs9为研究对象,对其进行固态发酵,采用硫酸铵沉淀及强阴离子交换柱对其所产β-葡萄糖苷酶进行分离纯化,通过十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)检测其分子质量,并研究其酶学性质.结果表明,快速纯化获得两种β-葡萄糖苷酶,分别命名为BGCC1和BGCC2,分子质量分别为41 kDa、53 kDa,比酶活力分别为8.6U/mg、12.2U/mg.两种酶都具有水解活性,可以水解纤维二糖得到葡萄糖;同时具有转苷活性,可以利用低分子质量的单糖合成纤维三糖和纤维四糖.两种酶的最适作用pH及温度均分别为6.0、60℃,均在pH 4~10和20~80℃条件下较稳定,Ag2+、Co2+、Cu2+、Hg2+对两种酶均有抑制作用,而Mn2+、Ca2+和Mg2+均有明显的激活作用,Zn2+和Ni+无明显影响.利用4-硝基苯基-β-D-比喃葡萄糖苷(pNPG)为底物,两种酶的动力学常数Km和最大反应速率(Vmax)均分别为2.76 mg/mL、20.6 U/mg.

何海燕、黄琦琦、黄智娴、罗艳妹、覃拥灵

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河池学院化学与生物工程学院,广西河池546300

微生物及植物资源开发利用广西高校重点实验室,广西河池546300

河池学院 农业生物技术应用研究中心,广西 河池546300

芽枝霉菌Lcxs9 β-葡萄糖苷酶 纯化 酶学性质 耐热性 水解活性 转苷活性

2020GXNSFAA29721831660017202110605012

2022

中国酿造
中国调味品协会 北京食品科学研究院

中国酿造

CSTPCD北大核心
影响因子:0.759
ISSN:0254-5071
年,卷(期):2022.41(7)
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