摘要
背景与目的:E2F3a是一种重要的转录激活因子,在多种肿瘤组织中均呈现表达上调.E2F3a在恶性化程度较高的神经胶质瘤中表达较高,目前它在胶质瘤细胞中的功能尚不清楚.本文的目的是研究E2F3a对U251胶质瘤细胞周期和凋亡的影响.方法:通过脂质体介导质粒转染在U251细胞中过表达E2F3a;用Westernblotting检测细胞内E2F3a蛋白质的表达水平;用PI-核DNA染色结合流式细胞术分析细胞周期分布;用Annexin V-PE和7-AAD染色结合流式细胞术分析细胞凋亡比例;用实时荧光定量PCR方法测定细胞内A2、B1、D1和E细胞周期素mRNA的相对表达水平.结果:与空载体转染对照组相比,E2F3a过表达可将位于S期的细胞比例提高28％(P＜0.01),将位于G0/G1期和G2/M的细胞比例分别降低15％和13％(P＜0.01).E2F3a过表达对细胞凋亡无明显影响.进一步研究发现,E2F3a可显著上调细胞周期素D1和E的mRNA表达,而不影响周期素A2和B1的mRNA表达.结论:E2F3a是胶质瘤细胞增殖的促进因子,它可通过上调细胞周期素D1和E的表达加速细胞由G1期进入S期.
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