摘要
目的:采用低分子肝素(LMWH)和聚乙二醇(PEG)对内皮抑素(ES)进行结构修饰并探讨修饰后ES的理化性质和生物学活性,寻找一种较好的内皮抑素修饰物.方法:采用高碘酸氧化法活化LMWH,制得的LMWH活化液于pH 9.5、0.3mol/L的NaCO-NaHCO3缓冲液中对内皮抑素进行化学修饰,氰脲酰氯法活化PEG,活化后的PEG在ph 9.0、10mmol/L的四硼酸钠缓冲液中进行修饰反应.SDS-PAGE电泳监测修饰反应过程,比较不同时间点修饰液的自由氨基修饰率、活性保留百分率;用Sephadex G-50凝胶过滤层析柱进行分离纯化,并进行电泳鉴定;观察内皮抑素及修饰后内皮抑素在25℃和37℃水浴中的热稳定性;建立鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)模型,观察ES及修饰后ES对CAM血管生成的抑制作用.结果:LMWH和PEG均能很好的对ES进行化学修饰,修饰后ES能保持较好的活性和稳定性,且PEG-ES对新生血管的抑制作用优于LMWH-ES.结论:PEG是一种较好的内皮抑素修饰物.
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