目的 探讨miR-335-3p通过靶向调控FOXD1基因抑制骨肉瘤(osteosarcoma,OS)细胞的增殖和迁移的作用及机制.方法 使用RT-PCR法评估miR-335-3p在OS组织和临近组织,正常人成骨细胞系(hFOB1.19f)和OS细胞系(SAOS2、U2OS、MG63)中的表达;使用细胞增殖实验测定研究miR-335-3p过表达对U2OS、MG63的活力的影响;EDU染色和DAPI染色评估miR-335-3p过表达对U2OS、MG63迁移和侵袭的影响;荧光素酶报告基因测定法确定miR-335-3p靶向调控FOXD1编码基因发挥作用;蛋白质免疫印迹法检测OS细胞中FOXD1蛋白表达;pcDNA-FOXD1转染OS细胞,并评估细胞增殖、迁移和侵袭的水平.结果 miR-335-3p在OS癌组织和细胞中低表达;利用miR-335-33p mimic转染细胞后,可在体外抑制肿瘤细胞增殖、迁移和侵袭;miR-335-3p通过直接结合FOXD1 mRNA的3'-UTR发挥抑制作用,从而负面调节FOXD1的表达;miR-335-3p通过靶向调节FOXD1的表达,进而抑制OS癌细胞的增殖、迁移和侵袭.结论 miR-335-3p可通过靶定FOXD1来抑制OS细胞的增殖、迁移和侵袭,并且可能是抗癌治疗中有前景的治疗方向.
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