目的 探讨NF-κB信号通路在嗜肺军团菌感染RAW 264.7巨噬细胞中的作用.方法 建立嗜肺军团菌感染RAW 264.7巨噬细胞感染模型,分为对照组、感染组、PDTC抑制剂组.感染6 h、12 h、18 h、24 h后收集各组细胞,检测细胞因子和NF-κB信号通路相关因子的水平,并观察细胞爬片中嗜肺军团菌的增值情况.结果 感染组巨噬细胞内出现一个或多个吞噬囊泡,细菌在囊泡内生长并复制.ELISA结果显示,感染组细胞上清中TNF-α、IL-6和Caspase-1均升高,且TNF-α和IL-6在感染18 h后达峰值,而Caspase-1在感染12 h后达到峰值,后期(24 h后)又恢复至正常水平.抑制剂组TNF-α、IL-6和Caspase-1的水平均低于感染组,说明抑制剂降低了细胞因子的表达.实时定量PCR和Western blot检测结果显示,感染组P65和IκBα在mRNA水平和蛋白的磷酸化水平均上升.PDTC抑制剂能降低P65和IκBα的磷酸化水平,尤其是在感染12 h后.结论 嗜肺军团菌感染早期(12 h～18 h),巨噬细胞NF-κB信号通路被激活,TNF-α、IL-6和Caspase-1表达上升,限制了细菌在其体内的繁殖.
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