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基于结肠癌HCT116细胞三维培养模型的灵芝水提物抗肿瘤活性研究

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目的 采用结肠癌HCTl16细胞的二维(2D)和三维(3D)培养模型研究灵芝水提物(Ganoderma lucidum water extract,GLWE)的抗肿瘤作用.方法 采用紫外-可见光分光光度法测定GLWE中灵芝多糖(Ganoderma lucidum polysaccharides,GLP)、三萜和甾醇的含量,HPLC分析GLP中水溶性单糖的组成和比例;以Matrigel基质胶为基质材料建立体外HCTll6细胞3D培养模型,评价GLWE的抗肿瘤及辅助抗肿瘤活性;CCK-8法检测细胞活力;Real-time PCR检测细胞mRNA表达水平;Western blotting检测细胞蛋白表达水平.结果 GLWE中GLP和三萜及甾醇的含量分别为20.92％和7.18％,其中GLP主要由甘露糖、葡萄糖醛酸、葡萄糖、半乳糖、D-木糖、L-岩藻糖组成;GLWE和5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-FU)作用48 h可呈浓度依赖性抑制2D和3D培养的HCTll6细胞增殖;与2D培养相比,3D培养的HCT116细胞中整合素β1(Integrin β1)和钙黏蛋白(E-cadherin) mRNA的表达显著升高,并对GLWE和5-FU的敏感性降低;在HCT116细胞3D培养模型中,GLWE既可降低CDK2、CDK4和Bcl-2蛋白的表达,升高p21、p27、cleaved caspase-3和cleaved PARP蛋白的表达,还可显著降低Integrin β1和E-cadherin mRNA的表达,并加强5-FU的抗肿瘤活性.结论 GLWE通过抑制细胞周期和诱导细胞凋亡而抑制3D培养的HCTI16细胞增殖,并通过抑制Integrin β1和E-cadherin mRNA的表达增强5-FU的抗肿瘤活性.
Study on the Anti-Cancer Activity of Ganoderma lucidum Water Extract Based on the Three-Dimensional Culture Model of Colorectal Cancer HCT116 Cells

潘海涛、张国亮、钱华、王汉波、徐靖、赵建霞、史月姣、李振皓

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浙江寿仙谷植物药研究院有限公司,杭州311100

浙江寿仙谷医药股份有限公司,浙江武义321200

武义寿仙谷中药饮片有限公司,浙江武义321200

浙江省珍稀植物药工程技术研究中心,浙江武义321200

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灵芝 结肠癌 三维培养 E-cadherin Integrin β1

2017C020112019C02100

2021

10.13748/j.cnki.issn1007-7693.2021.13.003

中国现代应用药学
中国药学会

中国现代应用药学

CSTPCDCSCD北大核心
影响因子：0.877
ISSN：1007-7693
年,卷(期)：2021.38(13)
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