目的 探讨蛇毒半胱氨酸蛋白酶抑制剂(snake venom cystatin,sv-cystatin)重组蛋白对肿瘤细胞凋亡的影响及其分子机制.方法 将sv-cystatin重组蛋白(10,25,50,100,200 mg·L-1)作用于B16F10和MHCC97H细胞,C57BL/6小鼠尾静脉注射B16F10细胞建立黑色素细胞荷瘤模型并给予25,50 mg·kg-1的sv-cystatin重组蛋白干预,建立MHCC97H细胞BALB/c-nude裸鼠腋下皮内成瘤模型并给予25,50,100 mg·kg-1的sv-cystatin重组蛋白干预,分别检测体内外细胞凋亡,检测重组蛋白体外作用后肿瘤细胞Bcl-2、Bcl-w和Bax的基因与蛋白表达,检测Cyto C蛋白表达和caspase-2、caspase-3酶活性.结果 与对照组相比,25,50,100,200 mg·L-1的sv-cystatin重组蛋白能够增强2种肿瘤细胞的体外凋亡能力(P＜0.05);C57BL/6小鼠肺转移结节中B16F10细胞(50 mg·kg-1)和BALB/c-nude腋下皮内肿瘤组织中MHCC97H细胞(100 mg·kg-1)的凋亡增强(P＜0.05);体外处理B16F10和MHCC97H细胞后Bcl-2和Bcl-w的基因与蛋白表达均下降,Bax表达则增强(P＜0.05),Cyto C蛋白表达增强(P＜0.05),caspase-2和caspase-3的活性上调(P＜0.05).结论 Sv-cystatin重组蛋白能够促进肿瘤细胞凋亡,从而发挥抗肿瘤作用.
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