目的 采用静电场轨道阱高分辨质谱仪,比较4种质谱解离技术在缩宫素多肽结构表征方面的应用.方法 采用内层涂布C18填料的毛细管色谱柱,以0.1％甲酸为流动相A,0.1％甲酸-乙腈(20 ∶80)为流动相B,梯度洗脱.电喷雾离子源正离子模式下,采用碰撞诱导裂解(collision induced dissociation,CID)、高能C阱碰撞解离(higher-energy collision dissociation,HCD)、电子转移解离(electron transfer dissociation,ETD)、电子转移/高能碰撞诱导解离(electron transfer/high energy collision dissociation,EThcD)4种解离技术,采集高分辨二级质谱图,比较不同解离技术在氨基酸序列表征方面的异同.结果 EThcD产生的特征性碎片离子最多,对氨基酸序列覆盖度最高,其次为ETD、HCD,而CID的覆盖度相对较低,且CID在缩宫素分子内二硫键的表征方面缺失,其余3种解离技术均可产生特征性碎片离子帮助判断二硫键.结论 相较于传统的CID,EThcD在缩宫素多肽序列结构表征中具有明显优势,HCD和ETD具有技术互补性,单独使用CID尚不能完全表征其多肽结构.EThcD在含有二硫键的多肽类药物结构表征中具有较大的应用前景.
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