目的 探讨纳米颗粒跟踪分析(nanoparticle tracking analysis,NTA)和纳米流式细胞仪(nano-flow cytometry,nanoFCM)对对照品微球和脂肪间充质干细胞(adipose mesenchymal stem cells,AdMSCs)的细胞外囊泡(extracellular vesicles,EVs)的检测能力,为EVs的鉴定和质量控制提供依据.方法 首先使用对照品微球来验证NTA和nanoFCM的检测能力.随后,对于聚乙二醇6000沉淀-超速离心法制备的AdMSCs-EVs,通过Western blotting和电子透射显微镜进行一般特征鉴定后,使用NTA和nanoFCM来检测其粒径分布和PKH67染色后的荧光颗粒占比.结果 NTA和nanoFCM在颗粒浓度方面的检测能力相近,但是nanoFCM的精度更高,粒径区分度更好.用NTA检测EVs的检测结果显示NTA粒径分布较广,nanoFCM粒径分布较窄;NTA的PKH67的荧光检测阳性率显著低于nanoFCM.结论 NanoFCM拥有较高的精度,但也存在着一定应用局限性.NTA的粒径区分度相对较差,但是可检测的粒径范围更广.因此,NTA可以满足EVs的粒径分布检测,对荧光检测具有较高灵敏度的nanoFCM更适合分析EVs的表面标志物比例.
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