摘要
为验证miR-7 和miR-30-5p对贵州黑山羊CTSK基因的调控效率及其对产羔基因的影响,通过生物软件筛选出调控CTSK效率最高的 2 条miRNAs:miR-7 和miR-30-5p;将 2 条miRNAs转染至卵巢颗粒细胞,并于转染后 24 h和 48 h分别提取细胞总RNA,采用qRT-PCR法分别检测 2 条miRNAs在转染 24 h和 48 h的表达效率;同时检测miR-7 和miR-30-5p过表达对CTSK基因及产羔相关基因FSHβ、GDF9、BMP15和BMPR-1B表达水平的影响.实验结果表明:转染miR-7 和miR-30-5p至卵巢颗粒细胞 24 h后,2 条miRNAs的表达水平均极显著高于对照组(NC组);转染 48 h后,miR-30-5p表达水平极显著低于NC组,而miR-7与NC组相比无显著性差异.此外,过表达 2 条miRNAs对CTSK基因和繁殖相关基因的影响发现,与NC组相比,转染miR-7 24 h后能极显著抑制CTSK的表达,且上调产羔基因 FSHβ、GDF9、BMP15的表达;而转染miR-30-5p对CTSK的表达无明显抑制作用,但极显著上调了产羔基因 FSHβ、GDF9、BMP15和BMPR-1B的表达.综上可见,与miR-30-5p相比,miR-7 更有可能通过抑制CTSK表达来促进产羔相关基因的表达,进而影响贵州黑山羊繁殖性能.本研究结果为后续研究miR-7 和miR-30-5p影响贵州黑山羊繁殖性状的分子机制奠定了基础.
基金项目
国家级大学生创新创业训练计划(202110657012)
贵州大学引进人才科研项目(贵大人基合字[2020]074号)
贵州省科技计划(黔科合支撑[2022]一般089)
黔南州农业攻关项目(黔南科合202127号)
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