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t-BHP诱导猪卵泡氧化损伤模型的建立

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本研究旨在构建猪有腔卵泡体外氧化应激模型，为延缓母猪的卵巢功能衰退和提高繁殖利用年限提供参考。本研究分别采用 100 μmol/L(低浓度组)、200 μmol/L(中浓度组)、400 μmol/L(高浓度组)的叔丁基过氧化氢(Tertiary-butylhydroperoxide，t-BHP)作为诱导剂处理猪卵泡 6 h，通过CCK-8 检测卵泡颗粒细胞(GCs)活力。筛选出 200 μmol/L(中浓度组)t-BHP作为后续处理浓度，用其刺激卵泡 1、2、6、12 h。用流式细胞仪检测细胞凋亡率、ELISA检测活性氧(Reactive Oxygen Species，ROS)水平以及用Western blot分析检测线粒体凋亡相关蛋白的表达。结果显示:GCs活力呈现浓度依赖性下降，半数抑制浓度(IC50)为 289。7 μmol/L;t-BHP诱导的氧化应激可导致GCs凋亡率明显升高(P<0。01)，卵泡内ROS在处理 6 h后增加(P<0。01)，Bcl-2蛋白水平降低(P<0。05)，Bax、Caspase 9蛋白水平上升(P<0。05)，细胞色素C(Cytochrome C，Cyt C)在胞质中表达升高(P<0。05)，在线粒体中表达降低(P<0。05)。综上，用 200 μmol/L t-BHP处理 6 h可以建立卵泡体外氧化损伤模型。

史佩华、贾青、陶晨雨

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河北农业大学动物科技学院,河北保定 071000

卵泡 t-BHP 氧化应激 细胞凋亡

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C2020204058KY2022030ZD20171832002175HBCT20181004044

2024

10.19556/j.0258-7033.20230112-05

中国畜牧杂志
中国畜牧兽医学会

中国畜牧杂志

CSTPCD北大核心
影响因子：0.704
ISSN：0258-7033
年,卷(期)：2024.60(1)
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