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山羊原代软骨细胞的分离培养与鉴定研究

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为探究山羊原代软骨细胞的体外分离培养和鉴定方法，本实验采用胰蛋白酶与II型胶原酶相结合的消化方法分离山羊原代软骨细胞。使用倒置显微镜观察并拍摄 1、3、5、7 d共 4 个时期的细胞形态;利用血球计数板对细胞计数并绘制生长曲线;RT-qPCR法检测山羊软骨细胞标志性基因;通过甲苯胺蓝染色法和II型胶原免疫荧光染色法对软骨细胞进行鉴定。结果显示:细胞形态由透亮的圆点逐渐变为三角形、短梭形等形态，最终转变为体积较大，形态圆润的多边形;细胞计数结果显示，1～7 d细胞数量逐渐增加，7 d达到峰值，7～11 d细胞数量逐渐减少。Acan和Col II基因mRNA相对表达量随细胞培养时间的延长而降低，MMP13基因mRNA相对表达量逐渐升高。甲苯胺蓝染色和II型胶原免疫荧光染色结果均为阳性。由以上结果可知，本实验成功获得大量活力良好的山羊软骨细胞，并建立山羊软骨细胞体外分离及培养的方法，为进一步研究山羊软骨相关体外试验提供参考。

陈子同、徐小丽、徐亮、陈欢、李利、张红平、曹家雪

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四川农业大学动物科技学院,四川成都 611130

软骨细胞 Acan Col Ⅱ MMP13 体外培养

国家自然科学基金四川省自然科学基金四川省归国人员科技择优项目

318020482022NSFSC16112021-22

2024

10.19556/j.0258-7033.20230411-06

中国畜牧杂志
中国畜牧兽医学会

中国畜牧杂志

CSTPCD北大核心
影响因子：0.704
ISSN：0258-7033
年,卷(期)：2024.60(4)
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