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猪转录因子YY1基因克隆、序列特征及真核表达载体构建

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YY1(Yin-Yang1,YY1)作为重要的转录因子对基因表达调控起到重要的作用。本研究旨在克隆猪YY1基因CDS区序列,利用生物信息学软件分析猪YY1基因编码蛋白的特性和功能。利用免疫荧光检测YY1在猪卵泡颗粒细胞中的定位;利用同源重组构建YY1真核表达载体,通过qRT-PCR及Western Blot(WB)检测YY1 过表达载体在猪原代卵泡颗粒细胞中的表达效率。本研究成功克隆了猪YY1基因全长CDS区,生物信息学分析结果表明猪YY1 蛋白由 411 个氨基酸组成,相对分子质量为 44。3 kDa,为亲水性与酸性蛋白,无跨膜结构域与信号肽,二级结构主要含有α-螺旋(16。06%)、延伸链(19。71%)、β-转角(7。54%)和无规则卷曲(56。69%),YY1 主要定位于细胞核,共含 39 个潜在的磷酸化位点,互作蛋白有EP300、E2H2、HDAC1、HDAC2 等。免疫荧光检测发现YY1 主要在猪原代卵泡颗粒细胞的细胞核中表达,qPCR和Western Blot检测结果显示该真核表达载体在猪原代卵泡颗粒细胞中成功表达。本研究为进一步探究猪转录因子YY1的生物学功能及提高母猪的繁殖率提供了理论依据。

邢文文、李梦轩、齐南南、刘吉英

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江苏科技大学生物技术学院,江苏镇江 212018

转录因子YY1 克隆 生物信息学分析 卵巢颗粒细胞 载体构建

国家自然科学基金江苏省自然科学基金江苏省研究生科研与实践创新计划

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2024

中国畜牧杂志
中国畜牧兽医学会

中国畜牧杂志

CSTPCD北大核心
影响因子:0.704
ISSN:0258-7033
年,卷(期):2024.60(4)
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