摘要
YY1(Yin-Yang1,YY1)作为重要的转录因子对基因表达调控起到重要的作用.本研究旨在克隆猪YY1基因CDS区序列,利用生物信息学软件分析猪YY1基因编码蛋白的特性和功能.利用免疫荧光检测YY1在猪卵泡颗粒细胞中的定位;利用同源重组构建YY1真核表达载体,通过qRT-PCR及Western Blot(WB)检测YY1 过表达载体在猪原代卵泡颗粒细胞中的表达效率.本研究成功克隆了猪YY1基因全长CDS区,生物信息学分析结果表明猪YY1 蛋白由 411 个氨基酸组成,相对分子质量为 44.3 kDa,为亲水性与酸性蛋白,无跨膜结构域与信号肽,二级结构主要含有α-螺旋(16.06%)、延伸链(19.71%)、β-转角(7.54%)和无规则卷曲(56.69%),YY1 主要定位于细胞核,共含 39 个潜在的磷酸化位点,互作蛋白有EP300、E2H2、HDAC1、HDAC2 等.免疫荧光检测发现YY1 主要在猪原代卵泡颗粒细胞的细胞核中表达,qPCR和Western Blot检测结果显示该真核表达载体在猪原代卵泡颗粒细胞中成功表达.本研究为进一步探究猪转录因子YY1的生物学功能及提高母猪的繁殖率提供了理论依据.
基金项目
国家自然科学基金(32202674)
江苏省自然科学基金(BK20200994)
江苏省研究生科研与实践创新计划(SJCX_1980)
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