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抑制Mic60在小鼠卵母细胞体外成熟过程中引起线粒体功能障碍和整合应激反应

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本实验旨在探究Mic60 在小鼠卵母细胞体外成熟中的作用。选取 4～6 周龄的雌性C57BL/6J小鼠，注射孕马血清促性腺激素(PMSG)48 h后采集卵母细胞并随机分为对照组和Mic60 抑制组(包括 50、100、130、150 μmol/L组，Miclxin组为130 μmol/L)。卵母细胞体外培养16 h后，通过免疫荧光染色检测纺锤体形态、ROS水平、线粒体分布和质量，利用qPCR检测抗氧化基因表达、线粒体呼吸链亚基的表达、整合应激反应相关基因的表达。结果表明:与对照组相比，130 μmol/L Mic60 抑制剂会降低卵母细胞体外成熟率(78。29%vs。21。08%，P<0。01)，并显著阻碍纺锤体的组装;与对照组相比，Miclxin组卵母细胞中的ROS水平升高(P<0。05)，且Sod1(0。83 vs。0。22)和Sod2(0。84 vs。0。27)基因表达降低(P<0。05)，线粒体分布异常比例升高(0。16 vs。0。57，P<0。05)，线粒体膜电位水平降低(1。61 vs。1。05，P<0。05)，ATP产生降低(1。16 vs。0。79，P<0。05);Miclxin组卵母细胞线粒体呼吸链复合体亚基Ndufv2和Sdha表达降低(P<0。05)，Cyc1 表达升高(P<0。05)，卵母细胞mtDNA拷贝数降低(19 324 vs。9 066，P<0。05);与对照组相比，Miclxin组卵母细胞Oma1、Dele1、Eif2ak1、eIF2α基因表达上调(P<0。05)，触发了整合应激反应(Integrated Stress Response，ISR)并上调了ISR主要效应因子Atf4、Atf5和Chop的表达(P<0。05)。可见，抑制Mic60 会通过损害线粒体功能并触发ISR影响卵母细胞体外成熟效果。

李晗星、夏威、陶晨雨、房晓欢、齐雅天、周振民、李俊杰

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河北农业大学动物科技学院,河北保定 071000

河北省牛羊胚胎工程技术研究中心,河北保定 071000

卵母细胞体外成熟 Mic60 线粒体功能 整合应激反应 小鼠

国家自然科学基金国家自然科学基金河北省重点研发计划

3227287131900586ZD2020108

2024

10.19556/j.0258-7033.20230512-03

中国畜牧杂志
中国畜牧兽医学会

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CSTPCD北大核心
影响因子：0.704
ISSN：0258-7033
年,卷(期)：2024.60(6)
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