摘要
细胞因子信号转导抑制因子 1(SOCS1)是一种调节细胞内信号通路活性的负调控因子,参与调控机体细胞的多种生理功能.为探索SOCS1基因沉默对猪乳腺上皮细胞增殖和凋亡的影响,试验通过构建猪SOCS1基因shRNA干扰载体,转染猪乳腺上皮细胞,TMT定量蛋白组学筛选差异蛋白,Annexin V/PI、CCK-8 和流式细胞术检测细胞周期、细胞增殖和细胞凋亡.结果显示,干扰组(shRNA-SOCS1-138)与空白组相比,共筛选到差异表达蛋白 52 个,其中上调蛋白 26 个,下调蛋白 26 个.GO富集发现,差异蛋白主要富集在病毒防御响应、EB病毒遗传缺陷反应后的免疫缺陷和对其他生物的免疫反应几个方面.KEGG通路富集发现,差异蛋白主要富集在坏死性凋亡、丙型肝炎和全身性红斑狼疮信号通路.干扰SOCS1后,乳腺上皮细胞 450 nm的OD值在 12、24、48 h和 72 h的细胞量显著或极显著高于空白组;G1 期和G2 期细胞占比均极显著高于空白组,S期细胞百分比极显著低于空白组;干扰组与空白组之间细胞凋亡率差异达到显著水平.综合研究结果揭示,SOCS1基因沉默可促进细胞增殖和降低细胞的凋亡,引起G1/S期阻滞,并受多个信号通路的调控作用.
基金项目
贵州省科技计划项目(黔科合平台人才[2021]5630号)
贵州省生猪产业发展项目(黔财农[2022]183号)
国家重点研发计划子课题(2022YFD1100308-01)
贵州省科技支撑计划(黔科合支撑[2021]一般147)
贵州省生猪产业技术体系建设(GZSZCYJSTX-03)