摘要
为探究千金藤素(Cepharanthine,Ceph)对牛卵母细胞抗氧化能力的影响及作用机制,本实验在牛卵母细胞体外成熟培养基中添加 0、10、100、500、1000 μmol/L Ceph进行培养,统计第一极体排出率,筛选出Ceph的最佳浓度,根据浓度将分为对照组和Ceph处理组,通过免疫荧光染色法检测活性氧(ROS)、谷胱甘肽(GSH)表达水平以及线粒体膜电位水平(JC-1);使用实时荧光定量PCR检测囊胚内抗氧化相关基因(SIRT-1、SOD-1、SOD-2)mRNA转录水平.结果表明:与对照组相比,添加 500、1 000 μmol/L Ceph可显著提高牛卵母细胞第一极体排出率,而 10、100 μmol/L Ceph组第一极体排出率显著降低,后续采用500 μmol/L Ceph用于实验;与对照组相比,添加 500 μmol/L Ceph显著降低了ROS水平,GSH及JC-1 水平显著升高,SIRT-1、SOD-1、SOD-2 mRNA表达水平也显著升高.由此可知,在体外成熟培养基中添加500 μmol/L Ceph可以缓解氧化应激损伤,维持线粒体膜电位,从而提高卵母细胞体外发育质量.
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