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T载体在噬菌体单链抗体库中的应用

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目的将T载体用于提高PCR产物的克隆效率,以构建大库容量的噬菌体单链抗体库.方法用传统的直接酶切的方法处理抗体轻链,直接连到经相同酶切的表达载体构建轻链抗体库;同时制备T载体,将抗体轻链克隆于T载体建成T载体克隆文库,然后再把轻链从T载体上切下来克隆到噬粒表达载体pDAN5,构建轻链抗体库.比较两种方法的效率.结果制备的T载体质量较好,可以满足建库所需,轻链T载体库为28×108,经过T载体过渡比直接酶切连接效率要高出将近1000倍.结论T载体的应用较好的解决了PCR产物克隆困难的问题,能够用于大容量噬菌体单链抗体库的构建.
The applicatiOn of T-Vector in SCFv phage Iibrary Construction

吕勇刚、窦科峰、赵爱志、韩月恒、刘杰、陈刚、陶开山、吴昱彤、药立波

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噬菌体抗体库 T-载体

国家自然科学基金

30371399

2004

中国新医药
中华医学健康学会

中国新医药

ISSN：1726-9393
年,卷(期)：2004.3(6)
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