目的用基因芯片技术分析不同分化程度的胶质瘤细胞增殖和凋亡相关的差异表达基因,为进一步研究胶质瘤细胞的增殖和凋亡机制奠定基础.方法用Trizol试剂盒(Gibco-BRL)抽提总RNA,用SuperscriptⅡ(Giboo-BRL)逆转录酶进行RT-PCR,并用荧光染料Cy3&Cy5(Amersham Pharmacia)标记cDNA产物,然后进行芯片杂交,检测人胶质瘤细胞系CHG-5(WHO分级为Ⅱ级)和SHG-44(WHO分级为Ⅳ级)瘤细胞基因表达的差异,特别是与细胞增殖和凋亡相关基因表达的差异,并用Northem blot杂交来验证芯片结果.结果与CHG-5相比,HG-44细胞中检测到了有120个基因表达明显上调和22个基因表达明显下调,这些差异表达基因的种类很多,其中凋亡类相关基因共6个(上调基因有3个,下调基因3个),细胞周期与增殖类相关基因共12个(上调基因有5个,下调基因7个).芯片结果进一步得到Northern blot杂交结果的支持.结论初步揭示了胶质瘤进展的差异表达基因,特别是与细胞增殖和凋亡相关的差异表达基因.
NETL
NSTL
万方数据
维普
