摘要
[背景]病毒诱导的基因沉默(virus-induced gene silencing,VIGS)是植物抗病毒侵染的一种自然机制.[方法]以马铃薯Y病毒(Potato virus Y,PVY)脉坏死株系(PVYN)的外壳蛋白(coat protein,CP)基因为靶向序列,构建烟草脆裂病毒(Tobacco rattle virus,TRV)介导的基因沉默表达载体pTRV2-CP,转化农杆菌GV3101后,与pTRV1-GV3101混合成TRV::CP(OD6000.4~0.6)喷施处理剪叶后的烟苗,测定其侵染效率.人工接种PVY于对照及TRV::CP处理的烟苗,RT-qPCR检测、表型观察和小区试验评价TRV介导的VIGS体系对PVY侵染的沉默效果.[结果]①与TRV::00相比,接种PVY 35 d时,TRV::CP处理的烟株中PVY累积量减少了72.8%;②VIGS表达载体45 d内能有效表达;③温室盆栽和田间小区试验TRV::CP处理对PVY防治效果分别达到85.12%和73.08%.[结论]研究建立的VIGS体系能够沉默PVY CP基因的表达,有效防治烟草马铃薯Y病毒病,为PVY的防治提供了新的方法.
基金项目
中国烟草总公司湖南省公司科技项目专项(17-20ZDAa02)
湖南省教育厅开放基金(16K039)
湖南省公司烟草公司湘西州公司科技项目(YC16015)