摘要
目的研究TNF-α诱导心肌成纤维细胞增殖的信号转导机制，为设计早期防治心肌梗死和心衰的药物提供分子靶点.方法心肌成纤维细胞体外原代和传代培养后，用不同浓度的TNF-α刺激心肌成纤维细胞一定时间，用Western blot检测细胞膜Gq蛋白的表达；放射免疫方法测定细胞内三磷酸肌醇(IP3)的表达；薄层层析分析法测定细胞内DAG水平；免疫组化技术检测细胞内PKC的含量；流氏细胞方法检测细胞内Ca2+的释放；MTT法检测细胞增殖水平.结果 F-α能不同程度的诱导细胞Gq蛋白、IP3、Ca2+、DAG和PKC的增加，并表现了明显的时间-效应关系.剂量效应关系显示：20ng/ml TNF-α对Gq蛋白、IP3、PKC结果的影响较其它两个剂量组明显(P <0.05)，而细胞内DAG和Ca2+的水平在各剂量组间无明显差异，但与对照组比较差异有统计学意义(P <0.05).在这些信号物质改变的模式下，心肌成纤维细胞增殖水平较对照组明显增高(P <0.05).结论α通过激活细胞膜Gq蛋白介导的IP3/Ca2+和DAG/PKC途径诱导心肌成纤维细胞增殖，并以20ng/mlTNF-α较明显.
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