摘要
根据沙门氏菌特异性invA基因序列设计两对引物,建立兔源性沙门氏菌的PCR检测方法,并对PCR反应体系条件进行优化.选择不同菌株进行PCR扩增以验证该方法的特异性;然后对不同浓度的沙门氏菌DNA进行PCR扩增以检测该方法的敏感性.引物invA 1和invA 2进行PCR扩增后,产物长度分别为391和578 bp;对PCR反应条件进行优化,引物invA 1和引物invA 2的最佳退火温度分别为52.4和53.5℃;特异性试验结果显示,只有沙门氏菌可扩增出目的条带,而非沙门氏菌无任何扩增产物;敏感性试验结果显示,该研究所建立的PCR检测方法,引物invA 1的DNA最低检测浓度为0.118 pg/µL,引物invA 2的DNA最低检测浓度为1.18 pg/µL.结论:研究所建立的PCR检测方法具有良好的敏感性和特异性,适合兔源性沙门氏菌的检测.
基金项目
河南省重点研发与推广专项(192102110077)
河南省重点研发与推广专项(202102110093)
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