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雷珠单抗的大肠埃希菌胞外分泌表达、纯化及结构表征
雷珠单抗的大肠埃希菌胞外分泌表达、纯化及结构表征
Extracellular Expression and Purification of Ranibizumab in Escherichia coli and Its Structural Characterization
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中文摘要:
抗血管内皮细胞生长因子(VEGF)抗体可抑制新生血管的形成和生长,在年龄相关性黄斑变性眼科疾病的临床治疗中具有重要应用价值,特别是已上市的商品名为雷珠单抗的VEGF抗体Fab片段,在市场上取得巨大成功.本研究探索了雷珠单抗在大肠埃希菌中的胞外分泌表达技术,所表达的产品利用SDS-PAGE、Western Blot、肽谱图全序列分析和纳米差示扫描量热法(Nano DSC)等手段进行了初步的结构表征.结果 显示,本研究成功实现了雷珠单抗的大肠埃希菌胞外分泌表达,经过进一步的Capto L亲和色谱获得了有正确氨基酸序列的Fab产品,经质谱分析具有正确的二硫键配对,且具有与标准品相似的热稳定性,为其进一步的工业生产奠定了基础.
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作者:
罗曼玉、高阳、朱建伟、路慧丽
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作者单位:
上海交通大学药学院,细胞工程及抗体药物教育部工程研究中心,上海200240
关键词:
雷珠单抗
大肠埃希菌
胞外分泌表达
差示扫描量热法
肽谱图
出版年:
2020
中国医药工业杂志
上海医药工业研究院,中国化学制药工业协会
中国医药工业杂志
CSTPCD
CSCD
北大核心
EI
影响因子:
0.487
ISSN:
1001-8255
年,卷(期):
2020.
51
(2)
参考文献量
3