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S-腺苷甲硫氨酸合成酶基因的原核可溶性表达及其转化应用

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为提高来源于拟南芥的S-腺苷甲硫氨酸合成酶基因(SAM1)在大肠埃希菌中的可溶性表达水平,采用无缝克隆的方法分别将谷胱甘肽巯基转移酶、TrxA蛋白、小分子泛素样修饰物(SUMO)蛋白、MsyB蛋白、泛素类蛋白这5种不同的融合标签与SAM1进行了N端融合表达.结果 表明,SUMO蛋白作为融合标签时,SAM1表达菌株的可溶性蛋白表达量显著高于无融合标签的SAM1表达菌株,其细胞内可溶性蛋白总量达到401.19 mg/L.此外,对融合了SUMO蛋白标签的SAM1菌株和原始菌株进行菌体转化研究.结果 表明,在菌体量相同的条件下,SUMO蛋白作为融合标签的SAM1表达菌株对底物的转化率为69.80％,相比原始菌株提高了40.51％.因此,选择SUMO蛋白作为融合标签能显著提高SAM1在大肠埃希菌中的可溶表达水平,为下一步对S-腺苷甲硫氨酸合成酶进行工业化应用提供参考.
Prokaryotic Soluble Expression and Transformation Application of S-Adenosylmethionine Synthetase Gene

周晶辉、赵士敏、许岗

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湖南福来格生物技术有限公司,医药化工用酶技术国家地方联合工程研究中心,湖南长沙410100

拟南芥 S-腺苷甲硫氨酸 融合标签 蛋白可溶性表达

2020

10.16522/j.cnki.cjph.2020.07.009

中国医药工业杂志
上海医药工业研究院,中国化学制药工业协会

中国医药工业杂志

CSTPCDCSCD北大核心EI
影响因子：0.487
ISSN：1001-8255
年,卷(期)：2020.51(7)
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