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重组抗人上皮黏附因子人源化单克隆抗体的瞬时表达及体外活性检测

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人上皮黏附因子(EpCAM)在多种上皮相关癌症表面过表达,介导肿瘤的增殖、分化、转移及信号传导等多种活动,是一种有潜力的癌症治疗靶点.本研究通过构建哺乳动物细胞表达载体,优化转染条件,使用瞬时基因表达技术在HEK293E细胞中表达了重组抗EpCAM人源化IgG1型单克隆抗体(rhEpCAM-mAb).抗体经纯化后,采用乳酸脱氢酶释放法初步鉴定了其介导的抗体依赖细胞毒作用.结果 表明,rhEpCAM-mAb在HEK293E细胞中以DNA∶PEI为1∶5,轻链∶重链为1∶3的最优条件进行瞬时表达时,抗体表达量可达46.05 mg/L,抗体对EpCAM的亲和力为5.56×10-12 mol/L,它对SK-OV-3、SW480和OVCAR-3细胞抗体依赖的细胞毒作用的IC50分别为12.36、5.43、102.90 ng/ml.本研究利用瞬时基因表达技术能够快速获得重组单克隆抗体,并对其生物活性进行研究,为生物技术药物开发及生产提供理论支持.
Transient Expression and in vitro Activity Test of Recombinant Humanized Anti-EpCAM Monoclonal Antibody

王磊、边延林、朱建伟、张宝红

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上海交通大学药学院,细胞工程及抗体药物教育部工程研究中心,上海200240

人上皮黏附因子 重组人源化单克隆抗体 瞬时基因表达 HEK293E细胞 抗体依赖的细胞毒作用

2020

10.16522/j.cnki.cjph.2020.07.010

中国医药工业杂志
上海医药工业研究院,中国化学制药工业协会

中国医药工业杂志

CSTPCDCSCD北大核心EI
影响因子：0.487
ISSN：1001-8255
年,卷(期)：2020.51(7)
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