中国医药工业杂志2023，Vol.54Issue(3) ：366-373.DOI:10.16522/j.cnki.cjph.2023.03.010

抗SIRPα单克隆抗体的制备及其体外活性

Preparation and in vitro Activity of Anti-SIRPα Monoclonal Antibody

赵丽丽 赵文鹏 许永亮 张贵民 曹宇 刘忠
中国医药工业杂志2023，Vol.54Issue(3) ：366-373.DOI:10.16522/j.cnki.cjph.2023.03.010
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抗SIRPα单克隆抗体的制备及其体外活性

Preparation and in vitro Activity of Anti-SIRPα Monoclonal Antibody

赵丽丽 1赵文鹏 2许永亮 1张贵民 3曹宇 4刘忠3
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作者信息

  • 1. 山东新时代药业有限公司,山东临沂273400;哺乳动物细胞高效表达国家工程实验室,山东临沂273400
  • 2. 沈阳药科大学,辽宁沈阳110016
  • 3. 鲁南制药集团股份有限公司,山东临沂276000
  • 4. 山东新时代药业有限公司,山东临沂273400
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摘要

利用分子生物学技术构建可表达带有小鼠抗体Fc端(mFc)的信号调节蛋白α(SIRPα)的质粒,并转染至中国仓鼠卵巢癌细胞(CHO细胞)中来制备SIRPα-mFc蛋白.将获得的SIRPα-mFc蛋白作为抗原免疫BALB/c小鼠,并将免疫后的小鼠脾脏细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行细胞融合.经过酶联免疫吸附反应(ELISA)和流式细胞仪的多轮筛选后,得到7株靶向SIRPα的单克隆抗体.其中,40F3和57B10这2株单克隆抗体结合活性较高,半数效应浓度(EC50)分别为5.866、5.457 ng/mL;半数抑制浓度(IC50)分别为65.31、63.29 ng/mL,均优于商业化抗体SE5A5(抗SIRPα/p抗体,EC50为22.47 ng/mL,IC50为121.2 ng/mL).并且,这2株抗体的亲和力数量级在1×10-11且不与SIRPg结合,为后续的抗体人源化以及临床前研究提供了参考.

关键词

信号调节蛋白α(SIRPα)/单克隆抗体/抗体亲和力/制备/体外活性

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基金项目

山东省重点研发计划(2018TSCYCX-30)

山东省重点研发计划(tscy20200329)

出版年

2023
中国医药工业杂志
上海医药工业研究院,中国化学制药工业协会

中国医药工业杂志

CSTPCDCSCD北大核心
影响因子：0.487
ISSN：1001-8255
参考文献量2
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