摘要
目的 观察健脾清肠补肾方药物血清对成熟破骨细胞凋亡的影响,探讨其可能作用机制.方法 通过100 ng/mL核因子-κB受体活化因子配基(RANKL)和10 ng/mL巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)共同诱导小鼠单核细胞RAW264.7细胞株分化为破骨细胞,采用TRAP特异性染色进行鉴定.制备低、中、高剂量健脾清肠补肾方药物血清,终浓度分别为2.5%、5%、10%健脾清肠补肾方.流式细胞术检测破骨细胞凋亡率,Western blot检测破骨细胞Bcl-2、Bax蛋白的表达.结果 采用RANKL和M-CSF可成功诱导RAW264.7细胞株分化为破骨细胞.与空白对照组比较,健脾清肠补肾方各剂量组细胞凋亡率均明显升高(P<0.05),破骨细胞Bcl-2蛋白表达明显下调、Bax蛋白表达明显上调,Bcl-2/Bax比值明显降低,其中健脾清肠补肾方高剂量组变化最明显.结论 健脾清肠补肾方药物血清可促进破骨细胞凋亡,其作用机制可能是下调Bcl-2和上调Bax蛋白的表达.