摘要
目的 观察扶正化瘀方药物血清对人脐带间充质干细胞(HUCMSCs)增殖、迁移及旁分泌能力的影响.方法 贴壁法分离HUCMSCs,流式细胞术鉴定HUCMSCs表型并检测其分化能力;取第5代HUCMSCs,随机分为空白血清组及5％、10％、15％药物血清组,CCK-8法检测HUCMSCs增殖能力;克隆形成实验检测HUCMSCs增殖能力;划痕实验检测HUCMSCs迁移能力,测量划痕宽度并计算细胞迁移率.Transwell实验检测HUCMSCs迁移能力,统计迁移细胞数目.ELISA检测HUCMSCs旁分泌碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)能力.结果 分离培养的HUCMSCs高表达标志物CD90(99.8％)、CD105(97.1％)、CD73(99.9％)、CD44(100％),符合HUCMSCs表型特征并具有成脂/成骨分化功能.CCK-8结果显示,5％、10％、15％药物血清干预HUCMSCs后,均能促进HUCMSCs增殖(P<0.05).克隆形成实验结果显示,与空白血清组比较,5％、10％、15％药物血清组HUCMSCs克隆形成数量增加.划痕实验和Transwell实验结果显示,与空白血清组比较,5％、10％、15％药物血清组干预后,HUCMSCs迁移率明显升高(P<0.01),且随药物血清浓度增加,细胞迁移率呈上升趋势.ELISA结果显示,与同一时点空白血清组比较,5％、10％、15％药物血清组HUCMSCs旁分泌bFGF能力明显增强(P<0.05).结论 扶正化瘀方药物血清对HUCMSCs增殖、迁移和旁分泌bFGF能力有明显促进作用.
基金项目
国家自然科学基金(81873582)
上海中医药大学"研究生创新培养"专项科研项目(3489)
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