目的 基于自噬与上皮间质转化(EMT)角度探究补肺活血胶囊对肺纤维化(PF)小鼠的作用.方法 105 只C57BL/6J小鼠随机分为正常组,模型组,雷帕霉素组(2 mg/kg,腹腔注射),低、中、高剂量补肺活血组(0.32、0.63、1.62 g/kg补肺活血胶囊,灌胃)和补肺活血+3-MA组(1.62 g/kg补肺活血胶囊,灌胃;30 mg/kg 3-MA,腹腔注射).通过对小鼠气管内单次注射 2.5 mg/kg博来霉素(BLM)来诱导PF,造模成功后1d开始给药,持续21 d.统计小鼠存活率与体质量,采集肺泡灌洗液(BALF)并测定总细胞与总蛋白,测定肺组织湿干重比与羟脯氨酸水平,苏木精和伊红(HE)染色和Masson三色染色观察肺组织病理学变化,RT-qPCR法检测肺组织 EMT相关因子(E-cad、Vim、α-SMA、TGF-β1)mRNA表达,Western blot 法检测肺组织 EMT 相关蛋白以及自噬相关蛋白(p-mTOR、mTOR、P62、LC3-Ⅱ、LC3-Ⅰ、Beclin1)表达.结果 与模型组比较,雷帕霉素与补肺活血胶囊干预后PF小鼠生存率提高,体质量增加,肺组织湿干重比、BALF总细胞和总蛋白、羟脯氨酸水平均降低,肺组织病理形态改善,肺组织上皮细胞标志物E-cad mRNA及蛋白表达升高,间质细胞标志物Vim、α-SMA、TGF-β1 mRNA和蛋白表达降低,p-mTOR/mTOR、P62 蛋白表达降低,LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ、Beclin1 蛋白表达升高;3-MA干预后PF小鼠各指标与模型组无明显差异.结论 补肺活血胶囊可通过促进上皮细胞自噬并抑制EMT来缓解BLM诱导的PF小鼠肺损伤.
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