目的 研究黄芩-黄连药对对胰岛素分泌的调节作用及其对甜味受体信号通路相关蛋白表达的影响.方法 体内实验,采用高糖高脂饮食建立糖尿病前期大鼠模型,黄芩-黄连药对干预14d后进行口服糖耐量实验(OGTT)及测定OGTT各时间点血清胰岛素水平,采用稳态模型法计算大鼠胰岛素抵抗(IR)指数;HPLC测定血清中 3-脱氧葡萄糖醛酮(3DG)含量;蛋白质印迹法检测大鼠胰腺组织甜味受体信号通路蛋白表达.体外实验,采用MTT法检测大鼠血清对INS-1细胞活性的影响,通过3DG诱导建立胰岛功能受损的INS-1细胞模型,黄芩-黄连药对含药血清进行干预,采用ELISA法检测INS-1 细胞在低糖和高糖刺激下的胰岛素分泌量;蛋白质印迹法检测INS-1 细胞甜味受体信号通路蛋白表达.结果 体内实验,与正常组比较,模型组FBG值、FINS值、IR指数、糖负荷后各时间点血糖值均提高(P＜0.05,P＜0.01),糖负荷 30 min血清胰岛素值降低(P＜0.01),糖负荷 60 min血清胰岛素值升高(P＜0.01),血清 3DG含量升高(P＜0.05),胰腺组织甜味受体信号通路T1R2、T1R3、PLCβ2 和TRPM5 蛋白表达均降低(P＜0.01);与模型组比较,黄芩-黄连组上述指标均有改善(P＜0.05,P＜0.01).体外实验,10%和 20%黄芩-黄连药对含药血清对INS-1细胞活性无明显影响(P＞0.05).与正常组比较,模型组细胞在低糖刺激下胰岛素分泌增加(P＜0.01),高糖刺激下减少(P＜0.05),细胞T1R2、T1R3、PLCβ2 和TRPM5 蛋白表达均降低(P＜0.01);与模型组比较,黄芩-黄连组上述指标均有改善(P＜0.05,P＜0.01).结论 黄芩-黄连药对对胰岛素分泌紊乱的调节作用与其调控β细胞甜味受体信号通路有关.
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