目的 探究和枢消积方对肝纤维化大鼠的影响.方法 40 只大鼠随机分为模型组,和枢消积方低、中、高剂量组(1.625、3.25、6.5 g/kg),秋水仙碱组(0.12 mg/kg),每组8 只,腹腔注射40%四氯化碳6 周建立肝纤维化模型,同时给予相应药物干预 6 周;另取 8 只大鼠作为正常组,予以生理盐水(1 mL/100 g)干预 6 周.给药结束后,检测肝功能及肝脏组织病理学变化,免疫组化法检测肝组织α-SMA蛋白表达,Western blot法检测肝组织Collagen Ⅰ、Collagen Ⅲ蛋白表达.利用网络药理学预测和枢消积方防治肝纤维化相关靶点及信号通路,并通过ELISA、RT-qPCR、Western blot法对相关靶点和信号通路进行验证.结果 与正常组比较,模型组大鼠肝组织胶原沉积,汇管区炎症细胞浸润,血清ALT、AST、TBIL、ALP水平升高(P＜0.01),肝组织α-SMA、Collagen Ⅰ、Collagen Ⅲ蛋白水平表达升高(P＜0.05);与模型组比较,各给药组肝组织炎症及胶原沉积均改善,血清ALT、AST、TBIL、ALP水平降低(P＜0.01),和枢消积方高剂量组和秋水仙碱组肝组织α-SMA、Collagen Ⅰ、Collagen Ⅲ蛋白表达降低(P＜0.05).网络药理学显示,和枢消积方防治肝纤维化核心靶点主要为Akt1、TP53、VEGFA、IL-1β,可通过调控PI3K/Akt、TNF-α、IL-17 等通路发挥改善肝纤维化作用.与正常组比较,模型组大鼠肝组织PI3K、Akt mRNA表达,TNF-α、IL-1β、IL-6水平和p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt1 蛋白表达升高(P＜0.01);与模型组比较,和枢消积方高剂量组和秋水仙碱组肝组织PI3K、Akt mRNA表达降低(P＜0.05,P＜0.01),各给药组肝组织 TNF-α、IL-1β、IL-6 水平和 p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt1 蛋白表达降低(P＜0.05,P＜0.01).结论 和枢消积方可减轻肝纤维化大鼠肝脏炎症反应,从而发挥改善肝纤维化作用,其机制可能与抑制PI3K/Akt信号通路相关.
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