RT-PCR结合GeneScan检测SARS病毒的高灵敏度技术的建立及应用

Establish a sensitive technique detecting SARS Virus RNA by RT-PCR and GeneScan and it's application National Research Project for SARS, Beijing Group

梁燕 ¹闫梅 ¹刘敬忠 ¹肖白 ¹谭淑珍 ¹吕月平 ¹丁洁 ¹苏畅 ¹王臻 ¹徐莉莉 ¹李兴旺 ¹徐作军 ¹于常海 ¹王辰¹

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作者信息

1. 国家SARS防治紧急科技行动北京组;首都医科大学附属北京朝阳医院,北京,100020
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摘要

目的建立高度敏感的检测SARS病毒(SARS-CoV)RNA的技术,提高SARS病毒检出率.方法用RT-PCR技术扩增SARS-CoV138bp片段并荧光标记后,用ABI-310毛细管电泳仪和GeneScan软件对扩增产物进行分析,并以峰高的方式给出产物的相对产量,参考空白对照和阴性对照的峰高定出本批实验检测基线.高于基线者为SARS病毒阳性.结果检测了来自20例SARS患者的67份标本,与常规的琼脂糖凝胶电泳法的结果(23/67)相比,GeneScan法(38/67)检测SARS-CoV的灵敏度提高22.4%.全部20例患者的1-5种标本中都有1种、2种甚至3种、4种检出为阳性.病程1-22天的患者均能检出阳性.结论ABI-310仪检测SARS-CoV的灵敏度较高,有助于早期诊断.

关键词

严重急性呼吸综合征/SARS病毒/ABI-310毛细管电泳/GeneScan反转录-PCR

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基金项目

国家SARS防治紧急科技行动基金()

国家科技攻关项目(2003AA208102)

出版年

2004

中华实用医学

中华临床医药学会

中华实用医学

ISSN：1562-9031

参考文献量3

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