摘要
目的建立大量生产骨髓基质细胞的培养和保存方法.为组织工程骨的培养提供种子细胞.方法从4～5月龄新西兰大白兔胫骨上端髓腔抽吸骨髓,接种、培养及液氮冻存.通过显微镜观察其生物学表现,测定碱性磷酸酶鉴定其生物学特征.结果在培养过程中,未分化的骨髓基质细胞选择性粘贴于培养皿底,形态为成纤维细胞样,并成集落生长.培养至第9～10天时,贴壁细胞单层融合.传代后的细胞形成集落的趋势明显下降,但细胞形态仍表现为成纤维细胞样.经6次传代后,细胞数量已扩增至原来的5000倍左右.冻存后贴壁细胞形态仍为成纤维细胞样,复苏细胞贴壁时间延迟,但增殖速度和形态没有改变.可测出碱性磷酸酶活性.结论成功地建立了骨髓基质细胞的培养和冻存方法.
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