摘要
目的制备低温冻存后转染EBV-LMP2、来源于人脐血的树突状细胞(dendritic cell,DC)疫苗,观察分析疫苗的形态和表型.方法采用CD34+干细胞试剂盒,经MACS分选人脐血CD34+干细胞,GM-CSF和TNF-α诱导14天分化扩增为DC,低温冻存,再用包含EBV-LMP2基因的重组腺病毒感染DC制备EBV-LMP2-DC疫苗.倒置显微镜动态观察DC的形态,流式细胞仪检测EBV-LMP2-DC疫苗的CD86和CD83表型.结果 CD34+细胞在体外分化扩增过程中,数量逐渐增多,细胞形态由圆形逐渐变为不规则的毛刺状,并聚集成簇,发育为典型的成熟DC形态;冻存复温后,细胞回收率>85%;制备的EBV-LMP2-DC疫苗保持典型的成熟DC形态,细胞表型表达率CD86为71.69%,CD83为61.17%.结论人脐血来源的DC,低温冻存复温后制备的EBV-LMP2-DC疫苗仍保持功能成熟DC形态和表型,为下一步应用EBV-LMP2-DC疫苗防治鼻咽癌的临床研究提供理想的疫苗和实验依据.
基金项目
国家高技术研究发展计划(863计划)(2001AA217091)