[目的]探究地黄饮子(Dihuang Yinzi,DY)减轻老龄大鼠脑缺血再灌注损伤(cerebral ischemia-reperfusion injury,CIRI)的作用机制.[方法]30只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、DY低剂量组(6g·kg-1)、DY高剂量组(12 g·kg-1)、尼莫地平组(10 mg·kg-1).建立CIRI模型,进行神经功能评分,血小板聚集实验,采用2,3,5-氯化三苯基四氮唑(2,3,5-triphenyltetrazole chloride,TTC)、苏木素-伊红(hematoxylin-eosin,HE)和尼氏染色检测脑梗死率及病理改变,流式细胞术测定血小板α颗粒膜糖蛋白140(CD62P)表达,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time quantitative polymerase chain reaction,Real-time qPCR)检测沉默信息调节因子2同系物1-腺苷酸活化蛋白激酶-雷帕霉素靶蛋白/内皮型-氧化氮合酶(silent information regulator 2 homolog 1-adenylate activated protein kinase-mammalian target of rapamycin/endothelial nitric oxide synthase,SIRT1-AMPK-mTOR/eNOS)通路相关 mRNA 表达,免疫印迹法检测各相关蛋白表达情况.[结果]与假手术组比较,模型组神经功能评分、脑梗死率、血小板聚集率、CD62P表达、腺苷酸活化蛋白激酶(adenylate activated protein kinase,AMPK)mRNA,磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(phosphorylation-adenylate activated protein kinase,p-AMPK)和磷酸化一氧化氮合酶(phosphorylation-nitric oxide synthase,p-eNOS)蛋白表达显著上升(P＜0.01),SIRT1、mTOR 的 mRNA及 SIRT1 和磷酸化-雷帕霉素靶蛋白(phosphorylation-mammalian target of rapamycin,p-mTOR)蛋白表达显著降低(P＜0.05,P＜0.01),病理染色显示脑组织损伤严重,细胞核固缩.与模型组比较,DY高剂量组神经功能评分、脑梗死率、CD62P表达量、AMPK的mRNA及p-AMPK和p-eNOS蛋白表达显著降低(P＜0.05,P＜0.01),SIRT1、mTOR的mRNA及SIRT1、p-mTOR蛋白表达显著升高(P＜0.05,P＜0.01),病理染色结果显示脑组织损伤情况减轻;尼莫地平组与DY高剂量组相似.[结论]DY能够减轻CIRI引起的脑组织损伤,并起到神经保护作用,其作用机制可能与影响SIRT1-AMPK-mTOR/eNOS通路相关蛋白的表达有关.
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